Laporan Praktikum Sterilisasi

BAB I

PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang

   Kultur jaringan merupakan salah satu cara perbanyakan tanaman secara vegetatif. Kultur jaringan merupakan teknik perbanyakan tanaman dengan cara mengisolasi bagian tanaman seperti daun, mata tunas, protoplasma, sel, sekelompok sel, jaringan maupun organ , serta menumbuhkannya dalam keadaan aseptik serta menumbuhkan bagian-bagian tersebut dalam media buatan secara aseptik yang kaya nutrisi dan zat pengatur tumbuh dalam wadah tertutup yang tembus cahaya sehingga bagian tanaman dapat memperbanyak diri dan bergenerasi menjadi tanaman lengkap (Sany 2007: 1).

   Adapun prinsip-prinsip dalam kultur jaringan sendiri kita ketahui antara lain (1). Totipotensi Sel: Setiap sel dari manapun asalnya, akan mampu tumbuh menjadi tanaman sempurna kalau diletakkan pada lingkungan yang sesuai (Scheleiden & Sachwan, 1901), (2). Regenerasi Tanaman: Proses menuju diferensiasi ke arah pembentukan organ baru, (3). Bebas Kontaminasi Mikroorganisme, dan (4). Lingkungan (media) yang sesuai dengan pertumbuhan jaringan. Dapat dilihat salah satu prinsip adalah terbebas dari kontaminasi mikroorganisme. Ini artinya kultur jaringan merupakan perbanyakan tanaman dengan menggunakan bagian vegetatif tanaman, menggunakan media buatan yang dilakukan di tempat steril. Lingkungan yang sesuai dapat dipenuhi dengan menentukan media tumbuh yang sesuai dan penempatan pada kondisi yang terkendali berkaitan dengan intensitas dan periodisitas, cahaya, temperatur, dan kelembaban serta keharusan sterilisasi  (Hendaryono & Wijayani 1994: 2).

    Sterilisasi merupakan hal yang erat dengan pembuatan medium isolasi dan pembiakan mikroorganisme secara murni. Pengertian umum sterilisisasi adalah suatu proses yang berusaha membebaskan bahan atau alat dari mikroorganisme. Namun perlu diketahui bahwa bahan atau alat yang telah melalui proses sterilisasi tidak akan benar-benar bebas dari mikroorganisme. Tujuan utama sterilisasi adalah untuk meminimalkan gangguan oleh mikroorganisme yang tidak dikehendaki (kontaminan), sekaligus meminimalkan gangguan akibat proses sterilisasi itu sendiri sekecil mungkin (Sany 2007: 1).

    Sterilisasi dalam segala kegiatan kultur jaringan harus dilakukan di tempat yang steril, yaitu di laminar flow dan menggunakan alat-alat yang juga steril. Sterilisasi juga dilakukan terhadap peralatan, yaitu menggunakan etanol yang disemprotkan secara merata pada peralatan yang digunakan.  Teknisi yang melakukan kultur jaringan pun juga harus dalam keadaan steril. Tidak hanya terbatas pada peralatan, namun ruangan yang akan digunakan pun harus dalam kondisi aseptik. Tujuan utama dari sterilisasi ruangan maupun peralatan kultur pada dasarnya untuk menghindari kontaminasi oleh mikro organisme yang ada di peralatan maupun di udara bebas sekitar ruangan. Perlakuan tersebut mutlak dilakukan terutama pada ruang penabur atau tempat yang digunakan untuk penanaman eksplan (Fardiaz 1992: 2).

         Faktor-faktor yang perlu diperhatikan untuk keberhasilan kultur jaringan yaitu bahan sterilisasinya, kandungan unsur kimia dalam media, hormon yang digunakan, substansi organik yang ditambahkan dan terang atau gelapnya saat inkubasi. Dari sekian banyak permasalahan yang harus diteliti dan diperhatikan adalah komposisi media tumbuh pada kultur jaringan karena sangat besar pengaruhnya terhadap pertumbuhan dan perkembangan eksplan serta bibit yang dihasilkannya. Teknik aseptik merupakan salah satu kunci keberhasilan dalam kutur jaringan. Keaseptikan harus dijaga dalam proses pengkulturan, selain itu juga termasuk sterilisasi bahan tanaman (eksplan). Pada tahap ini dilakukan berbagai perlakuan untuk membersihkan kotoran yang ada di permukaan bahan tanaman (disinfestasi). Selain itu, zat pengatur tumbuh adalah senyawa organik bukan hara yang dalam jumlah sedikit dapat mendukung, menghambat dan dapat merubah proses fisiologi tanaman (Daisy 1994: 4).

1.2. Tujuan

         Praktikum ini bertujuan untuk mempelajari cara serta prinsip-prinsip sterilisasi alat dan bahan dalam teknik kultur jaringan tumbuhan.

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

Sterilisasi merupakan  suatu proses  untuk  mematikan semua organisme yang terdapat pada atau di dalam suatu benda. Sterilisasi basah dapat digunakan untuk mensterilkan bahan apa saja  yang dapat tembus uap air dan tidak rusak bila dipanaskan dengan suhu yang berkisar antara 110-121 . Sterilisasi dalam setiap proses baik fisika, kimia dan mekanik yang membunuh semua bentuk kehidupan terutama mikroorganisme atau usaha untuk membebaskan alat dan bahan dari segala bentuk kehidupan terutama mikrobia (Fardiaz 1992: 4).

Menurut Hamdan (2012: 11), bahwa sterilisasi dalam setiap proses yang umum dilakukan dapat berupa: (a). Sterilisasi secara fisik (pemanasan, penggunaan sinar gelombang pendek yang dapat dilakukan  selama senyawa kimia yang akan disterilkan tidak akan berubah atau terurai akibat temperatur atau tekanan tinggi). Dengan udara panas, dipergunakan alat “bejana/ruang panas” (oven dengan temperatur 170–180  dan waktu yang digunakan 2 jam yang umumnya untuk peralatan gelas), (b). Sterilisasi secara kimia (misalnya dengan penggunaan disinfektan, larutan alkohol, larutan formalin), (c).  Sterilisasi secara mekanik, digunakan untuk beberapa bahan yang akibat pemanasan tinggi atau tekanan tinggi akan mengalami perubahan, misalnya adalah dengan saringan/filter. Sistem kerja filter, seperti pada saringan lain adalah melakukan seleksi terhadap partikel-partikel yang lewat (dalam hal ini adalah mikroba).

Autoclaf adalah alat untuk mensterilkan berbagai macam alat dan medium kultur jaringan tumbuhan denan mengunakan tekanan 15 psi (1,02 atm) dan suhu 121°C . Sterilisasi dengan autoklaf adalah salah satu metode sterilisasi dengan uap air di bawah tekanan. Suhu dan tekanan tinggi yang diberikan kepada alat dan media kultur jarinan tumbuhan yang disterilkan memberikan kekuatan yang lebih besar untuk membunuh sel dibandingkan dengan udara panas. Biasanya untuk mensterilkan media diunakan suhu 121°C dan tekanan 15 lb/in² (SI = 103,4 Kpa) selama 15 menit (Torres 1989: 1).

Menurut Yuan (2012: 2), bahwa dalam metode kultur jaringan diperlukan lingkungan yang steril. Ada beberapa metode sterilisasi alat dan bahan tanaman. Sterilisasi dapat dilakukan dengan beberapa cara yaitu dengan pembakaran, pemanasan kering, pemanasan basah, penyaringan atau secara kimiawi. Sterilisasi dengan pembakaran yaitu alat-alat yang terbuat dari logam dapat disterilkan dengan cara memanaskan atau membakar di atas lampu spirtus. Sterilisasi dengan udara panas/kering pada alat-alat dari gelas seperti cawan petri, erlenmeyer, tabung piala, botol eksplan, tabung reaksi dan sebagainya dapat disterilkan dengan udara panas (oven) pada suhu 130 – 160^o C selama 1 – 2 jam. Alat-alat ditata tidak terlalu rapat agar sirkulasi udara antar tumpukan alat dapat berjalan lancar, sehingga semua alat dapat disterilkan dan dapat dengan mudah dijaga kesterilannya saat dikeluarkan dari alat sterilisasi.

Sterilisasi dengan uap panas (basah) pada bahan atau alat dapat disterilkan dengan uap panas atau secara basah pada uap panas biasa atau uap panas dengan tekanan tinggi, secara terus menerus (kontinyu) atau secara terputus putus (diskontinyu), khususnya medium pada suhu atau tekanan yang rendah. Untuk sterilisasi dengan cara ini sering kali menggunakan otoklaf. Sterilisasi medium biasanya dilakukan pada suhu 121^oC dengan tekanan 1 atm selama 15-30 menit, namun untuk medium yang tidak mudah rusak dapat dilakukan pada suhu atau tekanan yang sedikit lebih tinggi. Sterilisasi dengan bahan kimia yaitu bahan kimia tertentu sering digunakan untuk sterilisasi alat maupun bahan. Etanol 70% sering digunakan untuk sterilisasi permukaan pada alat yang sering dikombinasi dengan pembakaran pada api. NOCl (natrium hipoklorit) dan formalin juga sering digunakan untuk sterilisasi permukaan atau disinfestasi permukaan atau disinfeksi permukaan (Torres 1989: 1).

Suatu alat atau bahan dikatakan steril apabila alat atau bahan  tersebut bebas dari mikrobia, baik dalam bentuk vegetative ataupun spora. Suatu benda atau substansi hanya dapat dikatakan steril atau tidak steril, tidak  akan pernah mungkin ada setengah steril atau hampir steril. Untuk sterilisasi alat dan medium digunakan sterilisasi dengan mengunakan alat yang disebut autoclave. Sterilisasi dilakukan untuk membunuh bakteri dan cendawan yang melekat pada eksplan maupun pada alat serta bahan yang digunakan dalam penanaman eksplan (Fardiaz 1992: 4).

Menurut Pramono (2007: 1), bahwa metode sterilisasi alat dan bahan tanaman juga dilakukan sterilisasi dalam kegiatan  kultur jaringan harus dilakukan di tempat yang steril,  yaitu di laminar flow dan menggunakan alat-alat yang juga steril.  Sterilisasi lingkungan kerja yaitu sterilisasi yang dilakukan dalam penanaman eksplan agar mendapat tempat atau ruang yang steril dan bebas dari mikroorganisme. Tempat untuk menanam dan memindahkan eksplan yaitu disebut Laminar Air Flow. Dengan dihembuskannya aliran udara halus  dari blower melalui suatu filter HEPA (High Efficiency Particulate Air) dengan pori-pori kurang dari 0,3 µm. Fungsi aliran udara ini yaitu dapat mencegah kontaminan yang air borne selama penanaman. Sebelum bekerja, bagian dalam laminar disterilkan dengan alcohol 70% dan diratakan dengan tissue, kemudian dilanjutkan dengan menyalakan lampu UV selama 0,5-1 jam untuk mematikan kontaminan di permukaan tempat kerja.

Sterilisasi alat dan media dilakukan pada alat-alat seperti botol, erlenmeyer, beaker glass, petridish, pinset, scalpel, gunting, jarum ose, dll sebaiknya sebelum disterilisasi peralatan dicuci denga detergen kemudian dibilas dengan aquades dan dikeringkan. Kemudian dibungkus dengan kertas merang. Temperatur yang digunakan untuk sterilasasi alat-alat dengan autoclave 121°C pada tekanan 17,5 psi selama 20-30 menit. Sterlisasi bahan tanam yaitu bahan tanam yang ada dilapangan banyak mengandung debu, kotoran-kotoran dan berbagai kontaminan hidup pada permukaan. Apabila kontaminan ini tidak dihilangkan maka media yang mengandung gula, vitamin, dan mineral merupakan sumber energy bagi kontaminan yang ada. Prinsip sterilasasi eksplan adalah dapat mematikan kontminan tanpa membunuh eksplan, karena baik kontaminan maupun eksplan merupakan benda hidup. Berhasilnya teknik sterilsasi merupakan langkah awal keberhasilan dalam kerja kultur in vitro (Hadioetomo 1993: 1).

BAB III

METODOLOGI PRAKTIKUM

3.1. Waktu dan Tempat

Praktikum ini dilaksanakan pada hari Selasa, tanggal 06 November  2012 pada pukul 09.00 s/d selesai. Bertempat di Laboratorium Botani Jurusan Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam di Universitas Sriwijaya Indralaya.

3.2. Alat dan Bahan

Alat yang digunakan pada praktikum ini adalah aluminium foil, autoklaf, botol kultur, erlenmeyer, gunting kultur, kertas pembungkus, lampu bunsen, petridish, pinset dan scapel, sedangkan bahan yang dibutuhkan adalah  aquades dan medium.

3.3. Cara Kerja

    Disiapkan alat-alat yang berupa aluminium foil, Erlenmeyer, gunting, petridish, pinset tetes, scapel kemudian  dibungkus dengan kertas pembungkus. Botol kultur ditutup dengan aluminium foil. Sedangkan bahan-bahan berupa aquades dan medium disterilisasikan dengan cara dimasukkan dalam botol lalu ditutup dengan aluminium foil. Disterilisasi alat dan bahan dengan autoklaf pada suhu 121°C dengan tekanan 15 psi selama 20-30 menit.

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1.  Hasil

Berdasarkan praktikum didapatkan hasil sebagai berikut :

No.	Nama Alat	Gambar	Keterangan
1.	Autoklaf		Autoklaf adalah alat sterilisasi untuk alat dan medium kultur jaringan. Suhunya 121oC, tekanan uap 15 selama 15 menit
2.	Magnetic Stirer		Magnetic  stirer memiliki fungsi untuk menggojok dengan pemanas. Dengan                       menggunakan listrik, alat ini berfungsi sebagai kompor selain digunakan  sebagai penggojok.
3.	Elenmeyer		Alat ini digunakan dalam kultur jaringan tanaman sebagai sarana menuangkan air suling maupun untuk tempat media dan penanaman eksplan.
4.	Gelas ukur		Gelas ukur digunakan untuk menakar air suling dan bahan kimia yang akan digunakan.
5.	Pipet tetes		Pipet tetes digunakan untuk mengambil supernatan (larutan) protoplas atau untuk menambahkan KOH, HCL, menetralkan pH.
6.	Botol kultur		Botol ini digunakan untuk tempat menanam eksplan
7.	Gelas piala		Alat ini digunakan untuk menuangkan atau mempersiapkan bahan kimia dan air suling dalam pembuatan medium
8.	Gunting kultur		Alat ini digunakan untuk mengiris bagian tanaman atau eksplan.
9.	Aluminium foil		Aluminium foil berfungsi untuk menutup botol kultur.
10.	Pinset		Pinset digunakan untuk memegang atau mengambil irisan eksplan atau untuk menanam eksplan
11.	Cawan petri		Alat ini digunakan untuk tempat eksplan
12.	Scalpel		Alat ini digunakan untuk mengiris bahan isolasi protoplas
13.	Kertas Pembungkus		Kertas digunakan untuk membungkus alat-alat yang akan di sterilisasi

4.2. Pembahasan

       Berdasarkan hasil praktikum yang dilakukan diketahui beberapa alat-alat seperti erlenmeyer, pipet tetes, pinset, disseting set, gunting, magnetic stirer, scaple, botol kultur dan lain-lain. Dari alat-alat yang mempunyai fungsi dan cara pemakaian yang berbeda, namun disterilisasikan bersama menggunakan autoklaf. Sterilisasi adalah segala kegiatan dalam kultur jaringan yang sangat penting dan harus dilakukan ditempat yang steril, yaitu di laminar flow. Seperti yang diungkapkan Wetherell (1976: 1), bahwa lingkungan aseptic sebagai salah satu syarat utama suksesnya kegiatan kultur jaringan perlu diterapkan dengan sungguh-sungguh. Untuk itu perlu adanya usaha sterilisasi peralatan dan media yang akan digunakan dalam proses kultur agar bebas dari mikroba.

   Sterilisasi secara umum terdiri dari sterilisasi fisika, sterilisasi kimia dan sterilisasi modifide yaitu gabungan antara sterilisasi fisika dan kimia. Menurut Yuan (2012: 2), bahwa ada beberapa metode sterilisasi alat dan bahan tanaman yang dilakukan dengan beberapa cara yaitu dengan pembakaran, pemanasan kering, pemanasan basah, penyaringan atau secara kimiawi. Sterilisasi alat dan bahan tanaman juga dilakukan sterilisasi dalam kegiatan  kultur jaringan harus dilakukan di tempat yang steril, dan menggunakan alat-alat yang juga steril yaitu sterilisasi lingkungan kerja, sterilisasi alat dan media dan sterlisasi bahan tanam.

  Jenis sterilisasi yang baik digunakan adalah sterilisasi menggunakan autoklaf.         Autoklaf yaitu alat yang berfungsi untuk sterilisasi dengan uap panas bertekanan. Autoklaf dipakai untuk sterilisasi medium atau larutan atau alat-alat yang tidak tahan suhu tinggi. Prinsip kerjanya yaitu mensterilkan dengan bantuan uap. Menurut Wetherell (1976: 1), dalam waktu 10-15 menit hampir semua sel-sel mikroba dapat terbunuh oleh uap air yang sangat panas. Untuk mensterilisasi alat-alat dibutuhkan suhu uap air 250 oF (121°C) dalam waktu 15 menit. Untuk menaikkan suhu yang lebih tinggi dari titik didih tersebut yaitu dengan menaikkan tekanan uap air. Sedangkan menurut Estuningsih (2012: 1 ), jika panas digunakan bersama-sama dengan uap air disebut sterilisasi basah mengggunakan autoklaf, sedangkan jika tanpa uap air disebut sterilisasi kering menggunakan oven. Pada praktikum yang dilakukan hanya menggunakan sterilisasi basah yaitu menggunakan autoklaf.

  Percobaan sterilisasi kultur jaringan dilakukan dengan baik, kita bisa membuat kisaran konsentrasi dan waktu yang diperlukan untuk sterilisasi dengan rentang yang cukup lebar. Jika dengan konsentrasi tertentu tidak terkontaminasi tetapi eksplannya mati, berarti konsentrasinya harus diturunkan. Begitu juga sebaliknya, jika masih banyak kontaminannya, konsentrasi bahan harus dinaikkan supaya tidak terkontaminasi lagi. Sama juga halnya dengan waktu yang diperlukan untuk  sterilisasi. Jika masih banyak kontaminasi, berarti proses sterilisasi harus lebih lama. Jika kita telah berhasil mendapatkan satu kultur jaringan saja yang bebas kontaminan, maka kita dapat memperbanyaknya dalam jumlah banyak.

    Fungsi alat yang disterilisasikan adalah untuk menghindari adanya mikroorganisme yang masih terbawa oleh alat-alat yang akan digunakan, karena adanya mikroorganisme menyebabkan kontaminasi bahkan dapat menumbuh kembangkan bakteri yang belum benar-benar steril. Suatu alat atau bahan dikatakan steril apabila alat atau bahan  tersebut bebas dari mikrobia, baik dalam bentuk vegetative ataupun spora. Suatu benda atau substansi hanya dapat dikatakan steril atau tidak steril, tidak  akan pernah mungkin ada setengah steril atau hampir steril. Untuk sterilisasi alat dan medium juga digunakan sterilisasi dengan mengunakan alat yang disebut autoclave. Sterilisasi dilakukan untuk membunuh bakteri dan cendawan yang melekat pada eksplan maupun pada alat serta bahan yang digunakan dalam penanaman eksplan (Fardiaz 1992: 4).

    Labu erlenmeyer berfungsi sebagai tempat penyimpanan medium, memanaskan larutan, dan menampung hasil dari penyaringan. Di dalam kultur jaringan aluminium foil berfungsi untuk menutup botol kultur. Pipet tetes fungsinya sama dengan pipet ukur yaitu digunakan untuk memindahkan suatu cairan atau larutan, namun volume yang dipindahkan tidak diketahui. Lampu bunsen salah satu alat yang berfungsi untuk menciptakan kondisi yang steril adalah pembakar spiritus. Alat-alat ini dapat disterilisasikan dengan dibungkus aluminium foil, lalu disterilisasi dengan menggunakan autoklaf.

BAB V

KESIMPULAN

                  Dari hasil praktikum yang dilakukan dapat disimpulkan bahwa :

1.        Sterilisasi alat dilakukan pada alat-alat seperti botol, erlenmeyer, beaker glass, petridish, pinset, scalpel, gunting, jarum ose, dll sebaiknya sebelum disterilisasi peralatan dicuci denga detergen kemudian dibilas dengan aquades dan dikeringkan. Kemudian dibungkus dengan kertas merang dan dimsukkan ke dalam autoklaf.

2.        Temperatur yang digunakan untuk sterilasasi alat-alat dengan autoclave 121°C pada tekanan 15 psi selama 20-30 menit.

3.        Fungsi sterilisasikan adalah untuk menghindari adanya mikroorganisme yang masih terbawa oleh alat-alat yang akan digunakan, karena adanya mikroorganisme menyebabkan kontaminasi bahkan dapat menumbuh kembangkan bakteri yang belum benar-benar steril.

4.        Segala peralatan yang digunakan dalam kultur jaringan harus dalam keadaan steril melalui proses sterilisasi.

5.        Sterilisasi adalah membebaskan bahan dari semua mikroba. Cara sterilisasi terdapat kesamaan seperti pada oven dan autoclave. Hanya saja yang menjadi perbedaan yaitu metode penggunaannya.

  

DAFTAR PUSTAKA

Daisy. 1994. Laporan Kultur Jaringan. http://blogspot.com/2012/02/laporan-kultur-jaringan-pembuatan-media_822.html. 1 ± 2 diakses pada tanggal 8 November 2012.

Fardiaz. 1992. Cara Steilisasi Alat-alat dan Media Kultur Jarngan. http://eshaflora.blogspot.com/2010/02/cara-sterilisasi-alat-alat-dan-media.html. 1 ± 2 diakses pada tanggal 8 November 2012.

Hadioetomo, R.S. 1985. Mikrobiologi Dasar dalam Praktek. PT.Gramedia: Jakarta. 237 hal.

Hamdan. 2012. Laporan Kultur Jaringan Sterilisasi Alat. http://hamdan-maruli.blogspot.com/2012/02/lap-kultur-jaringan-sterilisasi-alat.html. 1 ± 2 diakses pada tanggal 8 November 2012.

Hendaryono & wijayani. 2002. Media Kultur Jaringan. http://kultur-jaringan. blogspot.com/2009/08/media-kultur-jaringan.html. 1 ± 2 diakses pada tanggal 8 November 2012.

Sany. 2007. Pembiakan Tanaman Melalui Kultur Jaringan. Jakarta: Gramedia. 213 hal.

Pramono. 2007. Sterilisasi dalam Kultur Jaringan. http://sterilisasi-dalam-kultur-jaringan.blogspost.com/2012/09/kultur-jaringan.html. 1 ± 2 diakses pada tanggal 8 November 2012.

Yuan. 2012. Kultur Jaringan Sterilisasi. http://yuangaknekoneko.blogspot.com/2012/03/kultur-jaringan-sterilisasi.html. 1 ± 2 diakses pada tanggal 8 November 2012.

Wetherell, dkk. 1976. Biologi. Jakarta: Erlangga. 211 hal.

PRAKTIKUM I

Judul      : PENGARUH PENGGUNAAN SERBUK DAUN KEMANGI UNTUK   PENGENDALIAN KUMBANG BERAS

Tanggal    : 10 Maret 2012

Alat           :  Adapun alat yang digunakan dalam praktikum antara lain :

1.    Tissue

2.    Aqua gelas 5 buah

3.    Kertas kasar

4.    Karet

5.    Gunting

Bahan       : Adapun alat yang digunakan dalam praktikum antara lain :

1.   Kumbang beras

2.   Serbuk daun kemangi

3.   Beras tanpa pestisida

Cara Kerja : Adapun cara kerja pada praktikum ini antara lain :

1.   Disiapkan alat dan bahan yang akan digunakan.

2.   Disiapkan aqua gelas dan diberi label pada masing-masing aqua gelas, kemudian diisi dengan beras yang tidak mengandung pestisida sebanyak 10 biji.

3.   Dimasukkan serbuk daun kemangi sesuai dengan takaran yang telah ditentukan pada masing-masing aqua gelas, kecuali pada aqua control dan dihomogenkan.

4.   Dimasukkan kutu beras sebanyak 3 ekor kedalam masing-masing aqua gelas, kemudian ditutup dengan kain kasar dan dilapisi dengan tisu lalu diikat dengan karet.

5.   Diletakkan pada suhu kamar, setelah itu diamati jumlah beras yang utuh, jumlah beras yang tidak utuh, serta jumlah kutu beras yang hidup dan yang mati selama satu minggu.

Tinjauan Pustaka      :

Hama gudang adalah hama yang menyerang komoditas hasil tanaman yang disimpan di gudang. Seperti Sitophilus sp, Trigoderma sp, Tribolium sp, Corcyra sp, Cryptolestes.  Hama gudang pada umumnya serangga yang menyerang produk ditempat penyimpanan (gudang). Hama gudang berpotensi  menyebabkan kehilangan hasil selama produk dalam penyimpanan. Kumbang beras atau kutu adalah serangga yang tidak bersayap dan berukuran kecil, yang dalam bahasa Inggris mencakup flea (kutu yang melompat, ordo Siphonaptera) dan louse (kutu yang lebih suka merayap, kebanyakan ordo Phtiraptera yangn semuanya adalah parasit). Dalam bahasa Indonesia keduanya tidak dibedakan, malah mencakup juga sebagian dari kerabat wereng (ordo Hemiptera) dan beberapa anggota ordo Coleoptera (Winarno, 1993).

Sebagian besar penduduk dunia saat ini mengkonsumsi beras sebagai bahan pangan utama, yaitu sebagai bahan penghasil tenaga (karbohidrat). Gabah dari sawah kemudian diolah di penggilingan padi (rice mill) muncullah beras untuk siap dimasak menjadi nasi Sitophilus sp adalah merupakan hama yang paling banyak menyerang beras dalam simpanan, bahkan beras dalam kemasan pun setelah kita beli dari supermarket misalnya sering kita lihat ada beberapa ekor sejenis kutu Padi (Oryza sativa L) (Naynienay, 2008).

            Komoditi beras merupakan komoditi primer, sehingga dalam penyimpanannya perlu diperhatikan sehingga serangan kutu tersebut dapat dikendalikan. Pada prinsipnya kerusakan komoditas dalam penyimpanan dipengaruhi oleh empat faktor utama yaitu bahan yang disimpan, gudang tempat penyimpanan, lingkungan sekitar gudang dan perlakuan untuk mempertahankan kualitas beras serta interaksi antara keempat faktor tersebut. Adapun faktor lingkungan yang dimaksud adalah : kebersihan dan ketaraturan lingkungan penyimpanan, kelembaban ruangan (RH), kadar air dalam komoditi. Gudang yang kotor banyak lekukan atau sampah dapat dijadikan tempat bersembunyinya kutu beras Sitophilus sp. Semakin lembab ruang penyimpanan semakin gampang terkena serangan kutu beras. Semakin tinggi kadar air semakin mudah terserang kutu beras. Kadar air ideal beras dalam impanan adalah Fumigasi dilakukan pada tumpukan beras/staple dengan menggunakan gas phosphin. Metil bromida yang cukup efektif saat ini sudah tidah boleh digunakan lagi untuk komoditi pangan. Kontrol atmosfer dapat menggunakan gas CO2 dan N2 dalam stapel yang disungkup. Kemasan hampa hanya dapat dilakukan untuk skala kecil, bila diaplikasikan pada skala besar maka biaya yang mungkin timbul akan tinggi sekali. Agar pengendalian kutu beras hasilnya maksimal maka harus dikombinasikan dengan beberapa cara pengendalian sekaligus (Kartasapoetra, 1994).

Untuk mengurangi pemakaian pestisida kimia maka pestisida nabati tentunya dapat digunakan sebagai alternatif pengendalian serangga. Pestisida yang berasal dari tumbuhan merupakan salah satu cara pengendalian yang mempunyai prospek untuk digunakan petani karena efektif dan aman terhadap lingkungan, mudah dibuat, residunya mudah hilang dan juga sangat terjangkau oleh daya beli  (Sudarmo, 1991).

Salah satu tanaman yang memiliki senyawa yang dapat digunakan sebagai pestisida nabati yaitu kemangi. Bagian dari tanaman kemangi yang digunakan adalah daun. Daun kemangi berdasarkan senyawa utama (bahan aktif) dalam minyak yang dimilikinya, maka dapat dibedakan menjadi 4 tipe yaitu: (1) tipe Eropa (methyl chavicol, linalool), (2) tipe Reunion (methyl chavicol, camphor), (3) tipe methyl cinnamate, dan (4) tipe eugenol (eugenol). Pada konsentrasi tinggi, senyawa methyl  memiliki keistimewaan sebagai antraktan. Dalam hal ini hama serangga tidak mampu memakan bagian tanaman yang disukainya. Sedangkan pada konsentrasi rendah, bersifat sebagai racun perut yang bisa mengakibatkan kematian bagi serangga (Mulyaman, dkk. 2005).

Ekstrak daun kemangi dapat dimanfaatkan untuk menanggulangi hama kumbang beras. Kemangi merupakan salah satu bahan alami yang dapat dimanfaatkan sebagai pestisida nabati yang sangat berperan dalam mengendalikan hama kumbang beras dan ulat. Pada pengendalian hama gudang atau kumbang beras dengan serbuk kemangi akan mempengaruhi siklus hidup dan daya tetas serta membuat kumbang beras mati karena aroma dari kemangi. Aroma khasnya berasal dari kandungan sitral yang tinggi pada daun dan bunganya (Tjitrosoepomo, 1994).

Hasil dan pembahasan  :

1.   Hasil

Tabel hasil dari pengamatan kumbang beras

Perlakuan	Jumlah kumbang beras yang hidup	Jumlah kumbang beras yang mati	Jumlah biji beras yang utuh	Jumlah biji beras yang tidak utuh
1	2	1	9	1
II	2	1	10	-
III	-	3	9	1
IV	1	2	9	-
V	1	2	10	-

Grafik dari pengamatan kumbang beras

2.       Pembahasan

Dari hasil praktikum ini dibahas tentang tabel pengamatan kumbang beras dimana dilihat jumlah kumbang beras yang hidup, jumlah kumbang beras yang mati, jumlah biji beras yang utuh dan jumlah biji beras yang tidak utuh.  Pada perlakuan ke-I yaitu perlakuan kontrol, dimana tidak diberi serbuk kemangi. Jumlah kumbang beras yang hidup terdapat 2 dan jumlah kumbang beras yang mati ada 1, kumbang beras mati bisa dikarenakan suhu kamar yang panas dan penempatannya pada lemari dan tidak ada jendela untuk ventilasi akibatnya mempengaruhi kumbang beras dan suhu kamar yang normal hanya 25°C sehingga  kalau melebih menyebabkan matinya kumbang beras karena suhu yang terlalu panas. Seperti yang diungkapkan Kartasapoetra (1991) Kriteria kehidupan hama produk pertanian dalam simpanan memerlukan keadaan suhu udara dan temperatur minimum dan maksimum. Biasanya batas antara temperatur minimum dan maksimum yaitu antara 5°C sampai 45°C. Temperatur optimum yang diperlukan bagi perkembangan serangga adalah 25°C sampai 35°C. Sedangakan jumlah biji beras yang utuh ada 1 dan jumlah biji beras yang tidak utuh ada 9. Disini beras hanya dimakan sedikit oleh kumbang beras, karena hanya terlihat patah. Dari beras yang diamati dapat dilihat apakah ditemukan telur, larva dan pupa. Tetapi karena waktu praktikum yang hanya satu minggu, sehingga tidak ditemukan perubahan pada siklus hidupnya.

Pada perlakuan ke-2 jumlah kumbang beras yang hidup dan  jumlah kumbang beras yang mati sama dengan perlakuan ke-I, hanya pada jumlah biji beras yang utuh ada 10 dan jumlah biji beras yang tidak utuh tidak ada yang patah atau rusak. Sedangkan pada perlakuan ke-3 semua kumbang beras mati, dan jumlah biji beras yang utuh tinggal 9 dan yang 1 rusak. Semakin tinggi konsentrasi serbuk kemangi yang diberikan maka semakin tinggi tingkat kematian. Menurut Natawigena (1985) Pengaruh serbuk kemangi mempengaruhi hidupnya karena Kemangi merupakan salah satu bahan alami yang dapat dimanfaatkan sebagai pestisida nabati yang sangat berperan dalam mengendalikan hama kutu termasuk kumbang beras.

Hama ini menginfestasi biji di lapangan dan di gudang. Kumbang betina menggerek biji dan meletakkan telurnya secara tunggal yang ditutupi cairan gelatin. Seekor kumbang betina dapat bertelur sampai 300-500 butir dalam 4-5 bulan. Telur menetas setelah 3 hari. Urat kakinya tidak berkembang, gemuk pendek, dan berwarna keputihan dengan kepala berwarna cokelat. Larva menjadi sempurna dalam waktu 36 hari. Lama hidup kumbang ini adalah 4-5 bulan. Dalam satu tahun kumbang ini mengalami 5-7 generasi (Sudarmo, 1991).

Daun kemangi mengandung minyak atsiri (metyl lxhaficol ) saponin, flafonoid, dan tanin. Aroma khasnya berasal dari kandungan sitral yang tinggi pada daun dan bunganya yang dapat mengendalikan hama kumbang beras. Seperti yang diungkapkan  Mulyaman (2005) Perkembangan atau kemunduran suatu populasi serangga hama dipengaruhi oleh : Faktor genetik atau faktor bawaan. Faktor ekologi antara lain : faktor makanan, faktor iklim, faktor musuh alamiah dan kegiatan manusia. Keempat faktor tersebut mempengaruhi kehidupan serangga baik secara bersama-sama atau sendiri-sendiri.

Zat yang terkandung dalam daun kemangi menimbulkan rasa ketidak sukaan pada serangga. Sehingga untuk memperoleh kelangsungan hidupnya maka serangga harus mencari tempat yang sesuai, dengan cara keluar dari bahan yang diberi perlakuan daun kemangi tersebut. Semakin banyak daun kemangi yang diberikan maka daya tolaknya terhadap serangga pun akan lebih cepat (Kartasapoetra, 1991).

Pada perlakuan ke-4 jumlah kumbang beras yang hidup ada 1 dan, jumlah kumbang beras yang mati ada 2, jumlah biji beras yang utuh ada 9 dan jumlah biji beras yang tidak utuh ada 1. Sedangkan pada perlakuan ke-5 jumlah kumbang beras yang hidup, jumlah kumbang beras yang mati sama dengan perlakuan yang ke-4, jumlah biji beras yang utuh 10 dan jumlah biji beras yang tidak utuh tidak ada. Menurut Kartasapoetra (1991) Makanan adalah faktor yang menentukan dalam kehidupan serangga. Makanan yang cocok dan cukup sangat berpengaruh terhadap perkembangbiakan serangga. Syarat mutlak untuk pertumbuhan dan perkembangan serangga adalah tersedianya makanan yang cocok dan sesuai. Ternyata pengaruh kemangi sangat besar bagi siklus hidup kumbang beras (Jamal, 1994).

Tanaman kemangi berdasarkan senyawa utama (bahan aktif) dalam minyak yang dimilikinya, maka dapat dibedakan menjadi 4 tipe yaitu: (1) tipe Eropa (methyl chavicol, linalool), (2) tipe Reunion (methyl chavicol, camphor), (3) tipe methyl cinnamate, dan (4) tipe eugenol (eugenol). Senyawa methyl eugenol tertinggi terdapat pada tipe eugenol yang berfungsi sebagai penarik (atraktan) lalat buah (B. Dorsalis) senyawa utama tersebut mampu menarik hama lalat buah jantan masuk ke dalam perangkap. Selain berperan sebagai atraktan, pestisida nabati dapat diaplikasikan dengan cara yang sangat sederhana yaitu dengan mengumpulkan daun kemangi segar, kemudian dikeringkan.  Hal ini disebabkan karena kemangi mengandung fenol (tynol) yang cukup tinggi mencapai 22,9-65,5 mg/g berat kering yang mampu berfungsi sebagai repellent dan anti microbial  (Kartasapoetra, 1994).

Kesimpulan     :

Pada praktikum ini dapat disimpulkan bahwa pengaruh serbuk kemangi terhadap pengendalian kumbang beras sangat berpengaruh pada pertumbuhan siklus hidup kumbang beras tersebut. Dimana dapat dilihat banyak kumbang beras yang mati dari pada yang hidup dan pada perlakuan kontrol yang tidak diberi serbuk kemangi juga dapat mati dan kemungkinan karena faktor lain, misalnya faktor suhu yang mempengaruhi siklus hidupnya. Kemangi merupakan salah satu bahan alami yang dapat dimanfaatkan sebagai pestisida nabati yang sangat berperan dalam mengendalikan hama kutu termasuk kumbang beras. Daun kemangi mengandung minyak atsiri (metyl lxhaficol ) saponin, flafonoid, dan tanin. Aroma khasnya berasal dari kandungan sitral yang tinggi pada daun dan bunganya.

Daftar Pustaka  :

Jamal. 1994. Hama Gudang. Online. http://pengendalianhama.com/tentang-hama-gudang/. Diakses 3 Juni 20012.

Kartasapoetra. 1994. Kumbang Beras atau Serangga. Online.  ttp://id.wikipedia.org/wiki/Serangga#cite_ref-Study_of_Insect.Ed-7_1-10. Diakses 3 Juni 2012.

Mulyaman. 2008. Pengendalian Kumbang Beras. Online.  http://hamadanpenyakittanaman.blogspot.com/2009/01/pengendalian-kutu-beras-sitophilus.html. Diakses 3 Juni 2012.

Natawigena. 1985. Ekstrak Serbuk Kemangi. Online. http://journalvertise.blogspot.com/2009/03/kemangi-ocimum-basilicum.html. Diakses 3 juni 2012.

Naynienay. 2008. Kemangi Terhadap Kumbang Beras. Online. http://www.search-results.com/web?qsrc=2417&o=15917&l=dis&q=serbuk+kemangi+terhadap+kumbang+beras&atb.Dserbuk%2520kemangi&local. Diakses 3 Juni 2012.

Sudarmo. 1991. Laporan Praktikum Hama Gudang. Online. http://www.blogspot.lwporwn-prwktikum-hama-gudang.html. Diakses 3 Juni 2012.

Tjitrosoepomo. 1994. Budidaya Kemangi. Online. http://budiboga.blogspot.com/2006_06_01_archive.html. Diakses 3 Juni 2012.

Winarno. 1993. Pengaruh serbuk Kemangi Terhadap Kumbang Beras.   Online. http://www.searchresults.com/web?q=pengaruh+serbuk+kemangi+terhadap+kumbang+beras&qsrc. Diakses 3 Juni 2012.